Stefanie Gruber absolvierte zunächst eine Ausbildung zur Bekleidungstechnischen Assistentin in Aschaffenburg und arbeitete dann zwei Jahre am Tetro alla Scala in Mailand. Anschließend studierte sie bis 1991 an der Mailänder Kunstakademie Kostüm- und Bühnenbild. Parallel zum Studium arbeitete sie ab 1989 in einer Mailänder Kostümschneiderei, deren Leitung sie 1994 mit übernahm. Im Jahr 2002 gründete sie in Mailand ein eigenes Atelier und arbeitet seitdem freiberuflich als Kostümbildnerin für Theater und Film. Stefanie Gruber zog 2012 mit ihrem Atelier nach Berlin. Seit 2014 ist sie regelmäßig für die Kostüme der OPERNALE-Produktionen zuständig, zuletzt 2021 für „Luise Greger, eine pommersche Gans“.